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液相保護(hù)柱在高效液相色譜(HPLC)分析中扮演著重要角色,特別是在處理色素、防腐劑等復(fù)雜樣品時,其預(yù)處理效果直接關(guān)系到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命。以下是對液相保護(hù)柱在色素、防腐劑高效預(yù)處理方面的詳細(xì)探討:一、液相保護(hù)柱的作用1.延長色譜柱壽命:保護(hù)柱能夠阻擋樣品中的顆粒和雜...
在日常別離剖析工作中,反相色譜柱的正確運用和維護(hù)十分重要,色譜柱運用是否妥當(dāng),直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會下降柱效、縮短運用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需留意下列問題,以維護(hù)色譜柱。(1)柱子在裝卸、替換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,避免柱床產(chǎn)生空地。(2)假如儀器用來做慣例剖析,樣品種類有限,但剖析次數(shù)多,則不妨為每一類慣例剖析配置一根專用柱,這樣有助于延伸柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械轟動。溫度的忽然變化或者使色譜柱...
任何HPLC或UHPLC柱都是有試用壽命的。正確使用和維護(hù)色譜柱可以延長其使用壽命,有利于該方法的經(jīng)濟性。重要的是遵循*的色譜慣例,如適當(dāng)?shù)臉悠分苽洌悠窇?yīng)通過0.45µm的膜過濾器進(jìn)行高效液相色譜過濾,通過0.22µm的過濾器進(jìn)行超高效液相色譜過濾);流動相的適當(dāng)質(zhì)量/純度(例如,用于等度模式的等度級溶劑,用于梯度洗脫的梯度級溶劑);過濾流動相,發(fā)展良好的方法,具有足夠強的洗脫能力,以盡量減少非特定的吸附;與所選色譜柱兼容的溫度、pH值和最大背壓范圍...
先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子。以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱體積)沖洗,再換成流動相。配制流動相時,應(yīng)各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調(diào)pH值時要精密到0.1。反相條件下使用時,要特別注意控制pH值范圍,pH值越...
無論正在利用何種相互作用,液相柱色譜法都分六個步驟進(jìn)行:柱平衡樣品裝載洗滌洗脫清洗色譜柱再生一、柱平衡:大多數(shù)液相色譜方案從樹脂平衡步驟開始。與目標(biāo)蛋白質(zhì)和所選樹脂相容的緩沖液通過柱子。一種常見的做法是用5-10柱體積(CV)的平衡緩沖液平衡柱。例如,蛋白質(zhì)與疏水相互作用樹脂的結(jié)合在高離子強度下有效。在選擇平衡緩沖液時也要考慮目標(biāo)蛋白質(zhì)的特性,因為離子強度等緩沖液因素會受到蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的限制;通常,人們會避免使用會使感興趣的蛋白質(zhì)變性或阻止其與固定相相互作用的平衡緩沖條件。二...
許多用戶對溶劑梯度洗脫分離后LC色譜柱應(yīng)該重新平衡多長時間有疑問。在這里,我們展示了對于反相和HILIC分離而言,再平衡周期短的令人滿意的結(jié)果。LC用戶通常會提出和討論關(guān)于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡LC色譜柱多長時間的問題。在本文中,我們根據(jù)最近對該主題的研究討論了細(xì)節(jié),并表明即使對于HILIC分離,在兩個柱體積數(shù)量級的短再平衡周期內(nèi)也可以獲得令人滿意的結(jié)果。一、核心概念在溶劑梯度洗脫模式下使用LC時,必須有一段時間,通常是在分析結(jié)束時,在溶劑梯度的第一部分中使用的流動相流...
高效液相色譜法是提取和純化甜味劑的可靠技術(shù)。在食品工業(yè)中被廣泛應(yīng)用;食品糖的甜味與蔗糖相似,熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中,但大多濃度較低(約1%),因此提取和純化成本很高。因此,迄今為止,食品糖主要通過化學(xué)方法生產(chǎn),使用催化木糖脫氫。一、在木糖轉(zhuǎn)化中引入HPLC一種有吸引力的替代方法是通過發(fā)酵將生物質(zhì)(例如麥秸)中的木糖轉(zhuǎn)化為食品糖。通過該工藝,甜味劑可以在溫和條件(大氣壓和環(huán)境溫度)下以高產(chǎn)率生產(chǎn),不含有害化學(xué)物質(zhì)。一旦微生物合成了所需的糖醇,就可以通過高效...